论文摘要
电化学发光（ECL）核酸传感器广泛应用于基于检测，药物研究，环境分析和食品安全等领域因为它的高灵敏性和高选择性。DNA与蛋白质的交互作用在DNA复制、转录和翻译的过程中起着非常重要的调控作用。本文分别选择了在电化学发光中常用的Ru（phen）32+和鲁米诺作为电化学发光剂。在此基础上构建了两种基于电化学发光的核酸传感器，并通过该传感器对于TATA结合蛋白（TBP）的特异响应实现了对于溶液中TBP浓度的检测。1.将Ru（phen）32+通过嵌入作用与双链DNA（ds-DNA）形成配合物作为电化学发光探针以TBP蛋白作为检测物。首先，将25个碱基的DNA探针和22个碱基的互补序列在溶液中进行杂交。将Ru（phen）32+嵌入该双链DNA的结构之中作为信号探针。然后，该双链DNA通过自组装固定到金电极表面。用TBP蛋白结合双链DNA前后Ru（phen）32+与共反应物三丙胺（TPrA）产生电化学发光信号强度来定量检测TBP蛋白的浓度。该方法的检测限很低，可以检测0.01nM浓度的TBP蛋白,而且由于不需要对DNA进行化学标记实验步骤简单。2.设计了一种新型的电化学发光核酸传感器，它以金纳米粒子作为信号传输探针来检测TBP蛋白的浓度。电极表面当存在Sp-dATP-α-S和Klenowfragment聚合酶存在时，DNA的聚合作用将使得DNA链含有巯基并与金纳米粒子发生特异性结合。而与TBP蛋白结合的双链则不能发生聚合反应。根据以往的报道，由于纳米金具有高导电性，大的表面积和对鲁米诺良好的电催化性能，纳米金能够催化放大电化学发光信号。实验的结果，该电化学传感器在浓度为0.5100nM有响应，这个检测限高于前一章节的数值。可见，在这个体系中金纳米粒子的催化放大没有很好体现。在这之后我们列举了相关的潜在可能性，需要在未来做更进一步的研究。