论文摘要
选育具有我国自主知识产权的抗除草剂大豆是目前我国大豆育种的重要目标之一。以子叶节为外植体的农杆菌介导的大豆遗传转化法是大豆遗传转化中常用的方法，其转化效率受到受体基因型、无菌苗状态、丛生芽诱导及生根过程等多种因素的影响。本研究筛选了11个大豆栽培品种，选择诱导率最高的东农50作为转化的受体品种，以子叶节为外植体建立农杆菌介导的大豆遗传转化化体系；确立了生长植株叶片对草丁膦的抗感性标准。主要结果如下：转化体系中，丛生芽诱导率可达72.34%，伸长率最高可达20.59%，伸长芽经1mg·L-1的IBA处理1min后插入生根培养基中生根，生根率达85.25%；对18株T0代再生植株进行PCR检测，得到10株同时表现bar基因和EPSPS基因阳性的T0代植株。经PCR检测，该转化体系的转化率最高时可达7.05%。本研究建立了草丁膦抗性鉴定方法，用涂抹叶片的方法对转基因后代进行抗性鉴定，T0代植株中有1株在草丁膦浓度为100mg·L-1条件下表现为抗，T1代植株中有4株在草丁膦浓度为100mg·L-1条件下表现为抗，6株在草丁膦浓度为150mg·L-1条件下仍表现为抗，2株在草丁膦浓度为200mg·L-1条件下仍表现为抗。