论文摘要
背景和目的煤工尘肺是尘肺病的一种,是煤矿工人在职业活动中因长期吸入生产性粉尘而罹患的肺组织广泛纤维化为主的全身性疾病。虽然国内外对尘肺病的发生发展过程进行了大量研究,但其具体机制还不十分明确。近年来的研究表明,机体免疫功能与尘肺病密切相关。本课题组前期采用噬菌体单链抗体库技术成功筛选出与人源尘肺病相关的6种强阳性克隆抗体,其中包括颗粒酶B(Granzyme， GzmB)抗体。颗粒酶是一种来自于细胞毒淋巴细胞(CTLs)和自然杀伤细胞(NK)释放的细胞浆颗粒的外源性丝氨酸蛋白酶,以往研究发现颗粒酶B在特发性纤维化患者肺组织中的表达增加,但颗粒酶B及其抗体在尘肺病中的表达变化及其意义尚未见报道。为此,采用人群流行病学调查研究,对煤工尘肺患者及接尘工人血清中GzmB抗体的表达水平进行检测,初步探讨其在煤工尘肺病发生发展过程中的作用及意义,为煤工尘肺病发病机制的研究提供相关依据。方法1、调查对象：共选择调查对象1260例,分为4组。其中：健康对照组393例,为河南省某医院的男性健康体检者；病例组328例,为河南省两市男性煤矿工人,根据现行尘肺病X线诊断标准确诊为煤工尘肺患者；观察对象组230例,男性煤矿工人,为同地区诊断的X射线胸片已出现尘肺病变但尚未达到壹期尘肺；接尘组309例,为同地区相同工作环境中正在接尘但X射线胸片尚未出现尘肺病变表现的男性煤矿工人。所有研究对象均接受问卷调查,且均排除自身免疫病及其他肺部疾病。2、对全部调查对象进行问卷调查,内容包括：尘肺病诊断报告、接尘作业史、个人基本情况、是否有家族遗传病史以及既往病史。3、血清标本的采集与检测：对调查对象进行空腹取外周静脉血5ml,分离收集血清,放入-80℃冰箱保存,避免反复冻融。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked-immunosorbent serologic assay, ELISA)法检测所有调查对象血清中GzmB抗体的表达水平。4、统计方法：采用Excel2007建立数据库,应用SPSS21.0统计软件对数据库进行统计分析,定量资料统计描述以(x±s)表示；定性资料率的比较采用χ2检验,检验水准α=0.05。结果1、煤工尘肺患者血清中GzmB抗体的OD值为1.478±0.450,高于接尘组(1.325±0.463)和对照组(1.377±0.430),差异均有统计学意义(P<0.05)。2、不同年龄调查对象血清GzmB抗体的表达：观察对象组中20～岁组血清中GzmB抗体OD值(1.215±0.424)低于40-岁组(1.469±0.453),差异有统计学意义(P<0.05)；煤工尘肺组中20～岁组GzmB抗体OD值(1.183±0.502)、40～岁组(1.359±0.430)低于60～岁组(1.539±0.442),差异均有统计学意义(P<0.05)。接尘组中20～岁组GzmB抗体OD值(1.267±0.459)低于40～岁组(1.446±0.449),差异均有统计学意义(P<0.05)。3、对观察对象组和煤工尘肺组按分别按工龄、吸烟和饮酒分组,煤工尘肺组中,壹期尘肺中工龄<25年组GzmB抗体表达量OD值为1.418±0.457,工龄>25年组GzmB抗体表达量OD值为1.534±0.443,差异具有统计学意义(P<0.05)。吸烟、饮酒状况不同,血清中GzmB抗体的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论煤工尘肺病人及接尘工人血清中GzmB抗体表达水平高非接尘人群,随着接尘工龄的增加GzmB抗体的表达水平升高。提示GzmB抗体可能参与了煤工尘肺的发生发展过程。