论文编号:SP001字数:13330,页数:40
摘 要
为研究腐竹生产过程中豆浆游离氨基酸含量的变化情况，本文建立一种测定豆浆中游离氨基酸的反相高效液相色谱法。优化条件为：Zorbax eclipse XDB-C18反相柱（150mm×4.6mm, 5μm）；流动相：甲醇和0.05mol/L醋酸钠的体积比线性梯度（T，B%）=0，0%；20，20%；50，90%，流速：1.0mL/min ，检测波长：338nm。在此条件下得到18种游离氨基酸的直线回归方程，相关系数都在0.9900以上。豆浆中游离氨基酸含量在0-29.67mg/100mL 之间 ，豆浆煮制过程中大多数游离氨基酸含量逐步增加。回收率在80%-120%之间。
关键词 高效液相色谱法 豆浆 游离氨基酸 柱前衍生 邻苯二甲醛
目 录
1 前言........................................................................1
1.1 大豆的简述...............................................................1
1.1.1 大豆的来源.............................................................1
1.1.2 大豆的营养价值...........................................................1
1.1.3 大豆的健功效............................................................2
1.2 豆浆简述.................................................................3
1.2.1 豆浆来源...............................................................3
1.2.2 豆浆的营养价值..........................................................3
1.2.3 豆浆的保健功效..........................................................3
1.3 本论文研究的方法与意义.....................................................4
2 材料与方法...................................................................5
2.1 材料.......................................................................5
2.1.1 样品与试剂...............................................................5
2.1.1.1 样品...................................................................5
2.1.1.2 试剂...................................................................5
2.2 仪器......................................................................5
2.3 方法.......................................................................6
2.3.1 试剂的配制.............................................................6
2.3.1.1 流动相的配制...........................................................6
2.3.1.2 衍生化试剂的配制.......................................................6
2.3.2 标准液的配制............................................................6
2.3.2.1 标准氨基酸溶液的配制...................................................6
2.3.2.2 混合标准氨基酸溶液的配制...............................................6
2.4 样品制备...................................................................7
2.4.1 豆浆煮制工艺.............................................................7
2.4.2 工艺要点................................................................7
2.4.3 样品处理................................................................7
2.5 色谱条件.................................................................8
2.6 操作方法.................................................................8
3 结果与分析.................................................................8
3.1 分离条件的摸索.............................................................8
3.1.1. 不同流动相的选择........................................................8
3.1.1.1 手动进样.............................................................8
3.1.1.2 自动进样.............................................................9
3.1.1.3 不同混合次数的选择...................................................11
3.1.1.4 确定比例.............................................................12
3.2 标准定性................................................................13
3.2.1 18种混合标准氨基酸色谱图................................................13
3.2.2 单标保留时间与色谱图....................................................13
3.3 定量实验..................................................................17
3.3.1 标准曲线的绘制与回归方程...............................................17
3.3.2 标准曲线与回归方程....................................................17
3.3.2.1 18种氨基酸标准曲线....................................................17
3.3.2.2 18种氨基酸回归方程...................................................20
3.4 样品处理与测定...........................................................20
3.4.1 样品处理的条件选择......................................................20
3.4.2 样品测定................................................................21
3.5 回收率试验...............................................................25
3.6 精密度....................................................................26
3.6.1 标准精密度.............................................................26
3.6.2 样品精密度.............................................................27
3.6.3 回收率精密度............................................................28
3.7 稳定性...................................................................29
3.7.1 标准稳定性.............................................................29
3.7.2 样品的稳定性试验........................................................30
3.8 样品氨基酸态氮含量.......................................................31
4 结论与讨论..................................................................32
4.1 结论....................................................................32
4.2 讨论......................................................................32
参 考文献..................................................................33
英文摘要....................................................................34
致 谢......................................................................35
HPLC法测定豆浆中的游离氨基酸......