论文摘要
本文以产气气杆菌为出发菌株,进行物理化学复合诱变和优良产酶菌株的筛选,以蜡质淀粉为唯一碳源分离并诱导产酶。经碘熏初筛和摇瓶发酵复筛,获得一株酶活力明显提高且产酶稳定的突变株UV2-10-6,产气气杆菌发酵液异淀粉酶酶活力从2.9592U/mL提高到17.5812U/mL,提高了4.9倍。通过单因素实验、部分因子实验、最陡爬坡实验和中心组合实验,确定最佳产酶发酵培养基为（g/100mL） :玉米淀粉1.9675,豆饼粉3.3176,醋酸铵0.48287,K2HPO4.3H2O 0.2775, CaCl2 0.005 , FeSO4.7H2O 0.005。培养基优化后酶活提高幅度显著,从优化前的17.5812U/mL提高到31.8555U/mL,提高了14个酶活单位,提高率达81.19%。通过对异淀粉酶产生菌UV2-10-6发酵条件优化的实验,结果表明因素由大到小的影响次序为B（培养温度）>A（发酵液初始pH值）>C（接种量）>D（发酵时间）。最佳培养条件为:发酵液初始pH值6.5、温度30℃、接种量4%、转速200rpm、发酵时间72h。酶学性质研究表明,由菌株UV2-10-6分泌的异淀粉酶最适反应温度为55℃,酶最适pH值为5.8,具有耐酸性的优势。Ca2+、Mg2+对酶活性具有显著的促进作用,且Ca2+对酶活影响较大,Hg2+、Cu2+、Al3+、Fe3+对酶活有较强的抑制作用, EDTA对酶具有显著的抑制作用。酶作用的最佳底物是蜡质玉米淀粉。