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不同品种黄花菜秋水仙碱含量比较及其亲缘关系鉴定

论文摘要

黄花菜(Hemerocallis citrina Baroni)为百合科萱草属多年生草本植物,是我国一种传统的食花蔬菜。由于栽培历史悠久,分布区域广泛,缺乏专业的种质资源收集和整理的机构,导致黄花菜种质资源复杂多样。此外,黄花菜中含秋水仙碱,食用不当容易造成秋水仙碱中毒。传统黄花菜加工工艺需经蒸煮日晒等步骤,加工繁琐、成本高,且易影响黄花菜的营养及品质,不利于黄花菜产业的进一步发展。本研究通过对国内黄花菜品种进行调查收集,建立黄花菜种质资源圃,利用溶剂萃取-液相色谱法对各品种黄花菜的秋水仙碱含量进行比较,并用SRAP分子标记对17种黄花菜亲缘关系进行鉴定,为黄花菜种质资源利用、植物学研究、品种分类、新品种选育等研究奠定理论基础,同时为黄花菜遗传图谱的建立、分子标记辅助育种等提供可能,为进一步育成低秋水仙碱含量或无秋水仙碱的黄花菜新品种提供理论参考。主要研究成果如下:1.对国内主要黄花菜产区的黄花菜品种进行调查,共收集29份黄花菜种质资源(其中野生黄花菜4份,地方品种6份),共1118个植株,并在山西农业大学园艺站建立了黄花菜种质资源圃。2.优化了溶剂萃取法提取黄花菜中秋水仙碱的提取工艺。通过正交试验分析得出溶剂萃取法提取秋水仙碱的最佳提取条件为以无水乙醇作提取剂,料液比为1:8,在85℃:恒温提取8h。利用溶剂萃取-高效液相色谱法对15种黄花菜中的秋水仙碱含量进行检测,结果表明秋水仙碱含量最高的黄花菜品种为长嘴子花,含量为13.53μg/g;最低的为桥头花,含量为1.69μg/g。3.利用正交试验建立黄花菜SRAP标记的PCR反应体系,并用15对引物对17份黄花菜种质进行SRAP分析,共获得146条条带,其中多态性条带72条,说明供试黄花菜遗传多样性较为丰富。SRAP指纹图谱聚类分析将供试材料分为2类5组。第一类中包含4组,第一组中马蔺黄花、蟠龙花和重庆野生黄花先聚在一起,表现出很近的亲缘关系,后与长嘴子花聚在一起。第二组中大同花、大同野生黄花及石井黄花最先聚在一起,后于窑子头野生黄花和小峪黄花聚在一起。大同黄花与大同野生黄花均采自大同,且亲缘关系很近,可推测大同黄花是由大同野生黄花驯化得到的品种。第三组中茶子花、茄子花和桥头花先聚在一起,大荔花、高葶花和线黄花聚在一起;第二类中淮安黄花和宿迁黄花聚在一起,具有很近的亲缘关系。第二类与第一类有同源性但亲缘关系较远。