论文摘要
本论文建立了诺龙化学发光免疫分析方法,并能同时检测群勃龙、丙酸诺龙、雄诺龙、美雄诺龙其他四种蛋白同化激素。在诺龙多克隆抗体制备基础上,对化学发光免疫分析中的主要参数进行了优化,即抗体包被量、酶标抗原的浓度、样品稀释液以及发光底物的种类及浓度。建立了诺龙化学发光酶联免疫分析方法,并对方法的性能指标进行了系统评价。该方法能同时检测诺龙、群勃龙、丙酸诺龙、雄诺龙、美雄诺龙五种蛋白同化激素,且具有很高的灵敏度,其中诺龙IC50=0.050μg/L, IC15=0.00378μg/L、群勃龙IC50=0.094μg/L, IC15=0.00330μg/L、丙酸诺龙IC50=0.66μg/L,IC15=0.259μg/L、雄诺龙IC50=1.40μg/L, IC15=0.0398μg/L、美雄诺龙IC50=2.40μg/L, IC15=0.078μg/L,与传统酶联免疫吸附分析方法相比,灵敏度提高了5-8倍,该检测方法的变异系数在20%以下。选取了猪肉、鸡肉和牛肉作为检测样品,通过甲醇提取,磷酸盐缓冲液稀释,即可消除样品的基质影响。实际样品中诺龙的平均回收率为83.2%-94.2%,表明方法的准确性。同时与传统酶联免疫吸附测定方法的检测结果比较,相关系数R2=0.9988；进一步利用高效液相色谱法对建立的诺龙化学发光酶免疫分析方法的准确性进行了验证,两种方法检测结果的线性相关系数R2值0.9816,研究结果说明所建立的诺龙化学发光酶免疫分析方法的准确性,能用于动物源性食品中诺龙类物质的快速检测。