论文摘要
黄柏是“三木药材”之一,始载于《神农本草经》,列为上品,距今有两千多年的药用历史。其性寒,味苦,具有清热燥湿、泻火解毒之功效。课题组前期在国家中医药管理局中医药行业科研专项“黄柏饮片规格及其质量评价标准研究”(201007012-3-2)支持下,完成了黄柏饮片分等研究,并制定了相应的质量标准。目的本实验旨在课题组成员前期对黄柏规格分等及质量标准建立的基础上,对黄柏不同规格、不同炮制品内在质量标准进行再研究,建立快速稳定评价黄柏质量的方法,以期更好控制黄柏饮片的质量。方法1运用高效液相色谱,建立同时测定黄柏中5种生物碱类成分(木兰花碱、黄柏碱、巴马汀、药根碱、小檗碱)的多指标质量控制方法。以主要成分小檗碱为内参物,建立其与木兰花碱、黄柏碱、药根碱、巴马汀之间的相对校正因子,运用校正因子计算30批样品中各成分的含量；用计算值与真实测值进行比较,以验证一测多评法的准确性和可行性。2利用近红外光谱技术,对不同样品进行近红外漫反射光谱采集,运用化学模式识别方法建立黄柏的判别模型；对道地产区及非道地产区黄柏近红外漫反射光谱进行分析,辨别黄柏道地性。以高效液相测定的黄柏生物碱含量值作为参照,运用近红外漫反射光谱采集84批不同黄柏样品的近红外漫反射光谱,采用偏最小二乘法建立黄柏生物碱成分的含量测定模型。3利用建立的新方法对不同规格、不同炮制品黄柏进行内在质量评价。结果1建立了同时测定黄柏中5种生物碱成分的多指标质量控制方法,并在此基础上,建立了黄柏中5种生物碱类成分“一测多评”法方法学考察模式；通过一测多评法对30批黄柏药材和饮片中5种生物碱进行含量测定,其计算值与实测值间无显著差异(RSD<5%)。该方法操作简单、专属性和重现性良好,在对照品缺乏的情况下,可以作为一个新模式用于黄柏药材的多成分定量分析。2建立了黄柏样品、不同产地黄柏、不同炮制品黄柏的鉴别模型。以MSC+2D为预处理方法,在4342.91-5006.3,5804.68-7500,8000-10000波段下,建立小檗碱、黄柏碱、木兰花碱及其总和含量测定模型,其R2值分别为0.9995、0.9760、0.9306、0.9995, RMSEC值分别为0.0453、0.0335、0.0396、0.0498。该方法结果准确可靠,适用于快速在线检测。结论本实验综合运用多指标质量控制方法和近红外光谱法对不同规格、不同炮制品黄柏进行内在质量研究,该方法准确可行,可用于黄柏生物碱类成分的质量控制。