论文摘要
海参是一种自溶能力很强的海洋动物，当其受到外界条件刺激时，易降解自溶，导致食用品质下降，造成经济损失。本研究以紫外线照射诱导海参（Stichopus japonicus）自溶，采用HE染色的方法在光学显微镜下观察自溶过程中海参体壁的微观组织结构变化；以Z-Phe-Arg-4MβNA为底物，建立海参体壁组织蛋白酶L活性染色组织化学方法；采用该方法在光学显微镜下研究自溶过程中海参体壁组织蛋白酶L在组织中的分布变化情况；同时监控组织蛋白酶L在自溶过程中的变化情况，进而揭示组织蛋白酶L和海参自溶的相关性及规律，为进一步了解海参自溶机理、控制自溶发生奠定理论基础。新鲜海参的角质层完整，上皮细胞多且排列整齐，结缔组织均匀有序；自溶后角质层逐渐破损，甚至消失，上皮细胞排列变得混乱；疏松结缔组织纤维网状结构变得稀薄；致密结缔组织纤维网状结构变得模糊。总体上，致密结缔组织的微观组织结构变化不如上皮及疏松结缔组织明显。光镜-酶活力染色组织化学法研究结果表明组织蛋白酶L在海参体壁中的分布具有不均一性，上皮及疏松结缔组织中酶分布比较密集，致密结缔组织中酶分布相对稀疏。随着自溶的进行，海参上皮及上皮下疏松结缔组织、致密结缔组织中的组织蛋白酶L均显示出由集中变分散的规律。这可能是酶从所在细胞器或细胞释放，在组织中扩散，导致局部酶浓度降低造成的。自溶过程中，组织蛋白酶L活力呈先上升后略有降低的趋势，且酶活力一直存在。综上所述，海参体壁组织中的组织蛋白酶L分布越密集，组织自溶现象越明显，二者之间出现了正向的相关性，说明组织蛋白酶L可能与海参自溶有关。自溶前，该酶位置集中，自溶过程中在组织中发生扩散，可能参与胞外结缔组织降解。