论文摘要
目的探讨肝X受体的人工合成激动剂TO901317抑制乳腺癌细胞增殖的分子机制，旨在为今后乳腺癌的分子靶向治疗提供新的思路。方法1.不同浓度的TO901317处理MCF-7细胞不同时间后采用MTT法检测对MCF-7细胞增殖的作用，流式细胞术检测对细胞周期的影响；western blot检测LXRα、NF-κB p65及cyclinD1等在MCF-7细胞中的蛋白表达。2.运用RNA干扰技术沉降MCF-7细胞中LXRα的表达，MTT法检测TO901317对LXRα siRNA转染的MCF-7细胞增殖的作用，western blot检测细胞中LXRα、NF-κBp65和cyclinD1蛋白表达的改变，间接免疫荧光法定位检测细胞中LXRα和NF-κBp65的蛋白表达。3.应用NF-κB抑制剂PDTC，采用MTT法检测TO901317对PDTC应用后的MCF-7细胞增殖的作用，western blot检测细胞中LXRα、NF-κBp65和cyclinD1等蛋白表达的改变。结果1.随着TO901317处理浓度的增加或处理时间的延长，TO901317对MCF-7细胞增殖的抑制作用逐渐增强，且能抑制MCF-7细胞进入S期，阻滞细胞于G1期。与此同时，MCF-7细胞中LXRα与LXRβ的蛋白表达均明显增强，NF-κB p65的蛋白表达则明显降低，I κBα蛋白表达的变化与NF-κB p65蛋白的趋势互补，检测到I κBα蛋白表达的逐渐增强，可进一步验证NF-κB p65表达被抑制的效应。此外，TO901317还可明显下调cyclinD1的蛋白表达。2. LXRα siRNA转染的MCF-7细胞中LXRα的mRNA和蛋白表达均明显下调。LXRα siRNA可明显延缓TO901317对MCF-7细胞增殖的抑制作用以及细胞中LXRα表达的上调及NF-κBp65和cyclinD1表达的下调。3. NF-κB抑制剂PDTC的应用可增强TO901317对MCF-7细胞增殖的抑制作用以及对细胞中NF-κB p65及cyclinD1蛋白表达的影响，但对LXRα的表达无明显改变，提示LXRα与NF-κBp65对应的上下游关系。结论1. TO901317可下调MCF-7人乳腺癌细胞中NF-κB p65的蛋白表达；2. TO901317通过激活LXRα，下调NF-κB p65和cyclinD1的表达，抑制MCF-7细胞增殖。