论文摘要
钩吻素子(koumine)为钩吻中含量最高的一种生物碱单体，属单萜吲哚类生物碱。本课题组先期系列研究表明钩吻素子具有高效低毒的抗慢性疼痛和抗类风湿性关节炎作用，提示钩吻素子具有创制新型药物的重大潜能。若将钩吻素子制成普通口服制剂，则存在血药浓度波动大，服药次数多的缺陷。为方便今后钩吻素子的临床应用，可通过缓释剂型减少给药次数，降低服药后血药浓度的波动，提高患者顺应性。本文拟通过调节Surelease包衣增重等因素以及包衣工艺的优化以获得体外释药12h的钩吻素子膜控缓释微丸的最佳制备工艺；采用影响因素试验和加速试验初步考察钩吻素子缓释微丸胶囊的稳定性；以自制钩吻素子普通片为参比制剂，测定钩吻素子缓释微丸胶囊比格犬单次口服给药后血药浓度-时间曲线，对其体内释药特性进行评价。主要研究内容如下：1.钩吻素子膜控缓释微丸的制备采用液相层积法制备钩吻素子载药微丸、底喷流化床法制备钩吻素子膜控缓释微丸。以微丸的收率、圆整度为指标，采用正交试验优化流化床上药和包衣的工艺参数。上药工艺参数优化结果为喷液流速为35r/min、鼓风频率为21HZ、雾化压力为0.03Mpa；包衣工艺参数优化结果为喷液流速为45r/min、鼓风频率为19HZ、雾化压力为0.05Mpa时，缓释微丸制备效果良好。以微丸的收率、圆整度和钩吻素子体外释放速率为评价指标，采用单因素考察试验优化筛选钩吻素子膜控缓释微丸处方。结果表明，羟丙甲基纤维素（HPMC）（5cps）作为黏合剂且浓度为15g/L时缓释微丸收率提高，圆整度好；缓释微丸的释放速率随着处方中包衣材料苏丽丝（Surelease）的增加而减慢，包衣增重30%时，12h内钩吻素子释放良好；缓释微丸的释放速率随着隔离层HPMC（5cps）的增加而减慢，HPMC（5cps）用量为1%时，钩吻素子12h内释放平稳。综上，单因素考察结果筛选优化的处方如下：缓释微丸处方质量（mg）空白蔗糖丸芯10000钩吻素子100HPMC300Surelease300钩吻素子膜控缓释微丸含药量为0.67%，处方工艺重现性和钩吻素子释放均一性均良好。综上提示，制备的钩吻素子膜控缓释微丸，工艺重现性和释放均一性良好，其在12h内体外释药稳定、缓慢、完全。2.钩吻素子缓释微丸胶囊的初步稳定性考察取300mg上述缓释微丸填装3号胶囊，得钩吻素子缓释微丸胶囊，规格为2mg/粒，初步考察钩吻素子缓释微丸胶囊的稳定性。影响因素试验结果表明，钩吻素子缓释微丸胶囊在60℃条件下放置10天，或在相对湿度为90%中室温放置10天，或在光照条件4000LX下放置10天，体外释放度发生明显变化，提示该制剂稳定性受高温、高湿及光照等剧烈因素影响较大。在钩吻素子缓释微丸胶囊稳定性影响因素试验的基础上进行加速试验，结果显示，缓释微丸在温度为40℃，相对湿度为75%下放置6个月，制剂的外观色泽、体外释放度均无显著变化。这为钩吻素子缓释微丸胶囊贮存条件设立提供实验依据。3.钩吻素子缓释微丸胶囊在比格犬体内的释药特性评价本部分建立了比格犬钩吻素子血药浓度LC-MS/MS测定方法。以自制钩吻素子普通片为参比制剂，LC-MS/MS测定钩吻素子缓释微丸胶囊比格犬单次口服给药后血药浓度-时间曲线，评价其在比格犬体内的释药特性。结果表明，钩吻素子缓释微丸胶囊与其普通片生物等效，但未有显著的缓释效果，提示本膜控缓释微丸制备及其体内释放特性评价有待于优化。本研究为后续的钩吻素子膜控缓释微丸优化制备提供参考。