论文摘要
池沼公鱼是一种小型淡水经济鱼类,在我国分布广泛,资源丰富,并且池沼公鱼的营养价值很高,包含多种人体必需氨基酸,多用于食品的加工领域。但用于医药领域还未见报道。试验中利用池沼公鱼提取出的抗凝活性成分来研制具有抗凝作用的功能性食品、抗凝药物,具有广阔的市场前景。重点研究内容如下：利用酶标仪来测定池沼公鱼各部位提取物的对凝血酶的抑制率。首先,将池沼公鱼沿着鳃盖底端分割为头、身两部分,分别经石油醚萃取、乙醇沉淀、热水浸提分为醇相、醚相、水相提取物,再将提取物干燥并配制成不同浓度梯度的溶液,利用酶标仪在505nm处测定OD值。计算出各部位提取物对凝血酶的抑制率。头部醇相各浓度的凝血酶抑制率为10%、16%、19%、42%、60%、62%。可以看出,浓度为80mg/mL-100mg/mL之间时,提取物对凝血酶的抑制率增长比较快,变化非常明显。头部和身部的其他提取物对凝血酶的抑制率随样品浓度变化不明显。测定池沼公鱼头部的多糖、蛋白质含量。在提取物溶液中用苯酚-硫酸法,绘制标准曲线测得多糖含量为4.5%。通过测定氮的含量计算蛋白质含量为12%。经过除蛋白、除色素、小分子杂质等精制处理后,多糖对凝血酶的抑制率显著增加,达到69%。利用单因素试验、正交试验的方法对池沼公鱼头多糖提取工艺参数进行优化,以对凝血酶的抑制率为指标,最后确定的最佳提取工艺参数组合为：匀浆时加入的生理盐水的量为池沼公鱼头体积的2倍,碱解时的时间为8h,碱解时加入碱液的体积为原液的5倍,碱解时的温度为30℃,此条件下头部提取物对凝血酶的抑制率为75%。DEAE-纤维素离子交换柱层析的方法,对池沼公鱼头部的多糖进行纯化,纯化后出现一大、一小的两个峰值,对收集的组分进行透析干燥后,对凝血酶的抑制率增加到89%,纯化效果良好。