论文摘要
目的：通过建立睾丸缺血再灌注损伤的模型,观察水通道蛋白1mRNA表达的变化与睾丸组织水肿程度的关系,探讨水通道蛋白1在睾丸缺血再灌注损伤中的作用。方法：采用睾丸动静脉结扎1h/再开通的方法,建立睾丸缺血再灌注损伤的模型。分别在术后12h,24h,36h,48h,5d取材,HE染色观察睾丸组织的病理改变,免疫组织化学法定位AQP1蛋白的表达,干湿比重法测量睾丸组织的含水量,荧光定量PCR法检测水通蛋白1mRNA的表达。结果：再灌注12h：术侧睾丸生精小管管间间隙增宽,生精上皮层数减少,管腔有少量精子,Johnsen评分8分；睾丸组织干湿比重值(85.67%±0.76%)高于假手术组(83.96%±0.45%)；AQP1基因的相对表达量为假手术组的1.94倍。再灌注24h：术侧睾丸生精小管内生精细胞大量脱落,生精上皮层状结构消失,管腔内几乎见不到精子,Johnsen评分6.5分；干湿比重值(87.33%±0.26%),达到了再灌注5d之内的最高值：AQP1基因的相对表达量为假手术组的4.95倍。再灌注36h、48h:术侧睾丸生精小管内各级生精细胞数量减少,排列紊乱,管腔中有精子生成,Johnsen评分7.5分；干湿比重值(85.98%±0.35%、85.13%±0.15%)与再灌注24h相比逐渐降低,但仍高于假手术组(83.96%±0.45%)；AQP1基因相对表达量与再灌注24h相比逐渐减少,分别为假手术组的3.20倍和2.43倍。再灌注5d：术侧睾丸生精小管管间间隙不再增宽,生精上皮内可见到大量未成熟的精子细胞,管腔中精子较少,Johnsen评分8.5分；干湿比重值(83.38%±0.15%)降低,且高于假手术组(83.96%±0.45%)；AQP1基因相对表达量为假手术组的1.33倍。以上结果差异均有统计学意义(P<0.05)。非术侧睾丸在光镜下无明显病理改变,但12h、24h、36h、48h时干湿比重值随着术侧的变化有小幅度波动,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)；非术侧睾丸AQP1基因的表达亦有小幅度波动。免疫组织化学结果显示AQP1定位在睾丸血管内皮细胞膜及睾丸的结缔组织。结论：AQP1可能参与了睾丸缺血再灌注损伤的病理生理过程,AQP1基因表达量的变化可能对睾丸组织的水代谢有一定的影响。