论文摘要
研究目的建立国人华法林群体药动学/药效学（PK/PD）模型，为临床个体化给药提供参考。研究方法1、建立RP-HPLC-UV法测定华法林血药浓度。2、应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测CYP2C91075A/C及VKORC1-1639G/A基因型。3、以接受华法林抗凝治疗的住院患者为研究对象，准确记录患者用药及相关信息，采集不同时间谷浓度血样2-4个，RP-HPLC-UV法测定华法林血药浓度，PCR-RFLP法检测患者CYP2C9及VKORC1基因分型。4、应用非线性混合效应模型(NONMEM)法考察患者性别、年龄、体重、CYP2C9及VKORC1基因分型、合并用药、肝肾功能、疾病状况等因素对华法林清除率及抗凝效应的影响，建立华法林群体药动学/药效学（Population Pharmacokinetics/Pharmacodynamics PPK/PD）模型。5、采用模型拟合优度诊断图评价模型拟合优劣，非参数自举法(Bootstrap)验证华法林最终模型内部有效性和稳定性，正态预测分布误差(NPDE)验证法评估模型的预测能力。研究结果1、所建立的RP-HPLC-UA法测定血浆华法林浓度，以地西泮为内标，保留时间12.8min；标准曲线回归方程为Y=0.1444X+1.0264（r=0.9994），线性范围48-2500ng·mL-1，最低检测限16ng·mL-1(S/N≥3)，方法回收率101%-103%,日内和日间RSD均<2.10%。2、本实验73例患者中,CYP2C9*1/*1型63例,CYP2C9*1/*3型10例；VKORC1-1639AA型62例、GA型10例、GG型1例。3、基于73例患者190个血药浓度数据、263个INR监测值及相关信息,建立了华法林群体药动学/药效学最终回归模型：其中,体重(WT)、CYP2C9及VKORC1基因分型是影响华法林药动学/药效学参数的主要因素。4、模型拟合优度诊断图显示,最终模型对华法林血药浓度和INR的拟合结果均优于基本模型；Bootstrap验证结果表明最终模型参数估算值均落在Bootstrap法估算值的95%置信区间,且相关偏差均<6.30%；NPDE检验显示方差齐性(P>0.05),且符合正态分布。研究结论1、RP-HPLC-UV法测定华法林血药浓度,准确、简便、重现性好,适用于常规监测及药动学研究。2、体重、CYP2C9及VKORC1基因分型是影响华法林PK/PD参数的主要因素。3、本研究基于NONMEM法建立的华法林群体PK/PD模型稳定、有效,具有良好的拟合优度与预测能力,可为临床个体化给药提供参考。