论文摘要
目的：观察蛇毒解离素对去卵巢大鼠体重、子宫湿重、骨密度（BoneMineralDensity,BMD）、骨代谢生化指标、骨小梁显微结构的影响，了解蛇毒解离素对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用，并通过利用RAW264.7小鼠巨噬细胞株（破骨前驱细胞株）加入细胞因子RANKL诱导破骨细胞形成，研究蛇毒解离素对体外培养的破骨前驱细胞形成及分化的影响，从而初步探讨其作用机制。方法：1、选用40只3月龄SD雌性末孕大鼠，随机分为5组每组8只：假手术组（Sham）、模型组（OVX）、戊酸雌二醇组（E）、蛇毒解离素高剂量组（D1）、低剂量组（D2）。采用手术切除大鼠卵巢方法建立绝经后骨质疏松症模型，Sham组仅切除卵巢周围部分脂肪组织。术后4周开始给药，其中E组给予戊酸雌二醇0.8mg/kg.d，D1、D2组分别给予蛇毒解离素100、25mg/kg.d，Sham组和OVX组给予蒸馏水9ml/kg.d。术后12周活体测量股骨骨密度后处死大鼠，迅速摘取子宫，称取湿重，获取大鼠血清、股骨标本，分别测定血钙、血磷、碱性磷酸酶（AlkalinePhosphatase, ALP）及骨小梁显微结构。2、采用小鼠巨噬细胞株RAW264.7,加入细胞因子RANKL诱导破骨细胞样细胞形成。并在诱导破骨细胞样细胞形成的过程中加入浓度为100ug/ul、10ug/ul蛇毒解离素,6天后进行TRAP抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察破骨细胞形态和蛇毒解离素对破骨细胞形成数目的影响。研究结果：1.与模型组相比，蛇毒解离素各剂量组骨密度升高（P<0.05），骨小梁显微结构明显改善（P<0.05），ALP测定值明显下降（P<0.05），血钙、血磷测定值明显升高（P<0.05）；与戊酸雌二醇组比较，蛇毒解离素各剂量组子宫湿重显著减轻（P<0.01）。2.蛇毒解离素对破骨细胞的形成和分化具有抑制作用。药物浓度越低则形成的破骨细胞样细胞数目越多。加药组与对照组相比，形成的破骨细胞样细胞数量经统计学检验结果有统计学意义（P＜0.05）。说明了蛇毒解离素对体外培养的破骨细胞形成有抑制作用，且与蛇毒解离素的药物浓度有关。结论：1、蛇毒解离素有助于抑制去卵巢大鼠骨量丢失，改善松质骨骨小梁显微结构，改善骨代谢，降低骨转换率，对去卵巢大鼠骨质疏松有治疗作用。2、蛇毒解离素可以抑制破骨细胞的形成和分化。