论文摘要
目的：为了研究Pan-HER抑制剂Afatinib单用以及分别与磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide-3kinase，PI3K）抑制剂PF-04691502和丝裂原活化蛋白激酶激酶（mitogen-activated protein kinase kinase，MEK）抑制剂Trematinib（GSK1120212）联合对耐药性非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer，NSCLC）细胞株H1975的体外抗肿瘤活性。方法：（1）通过MTS法测试比较EGFR可逆抑制剂Gefitinib、Lapatinib和Pan-HER不可逆抑制剂Afatinib分别对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975和EGFR高表达的胃癌细胞株N87增殖抑制的作用。（2）通过MTS法、细胞划痕愈合实验、流式细胞术测细胞周期和细胞凋亡来分析Afatinib和PF单药及联合对耐药性非小细胞肺癌株H1975增殖、迁移等的影响。（3）通过MTS法、流式细胞术测细胞周期和细胞凋亡、以及细胞活性氧浓度检测来分析Afatinib和Trematinib单药及联合对耐药性非小细胞肺癌株H1975体外抗肿瘤活性研究。结果：（1）Gefitinib、Lapatinib和Afatinib对N87细胞株的增殖抑制作用均强于对H1975细胞株增殖抑制作用，且在两种细胞株中Afatinib对细胞的增殖抑制作用均强于Gefitinib和Lapatinib的作用。（2）PF单用对H1975细胞增殖有抑制作用，抑制作用随浓度增加而加强；Afatinib和PF联合时对H1975细胞增殖、迁移均有明显协同抑制作用；Afatinib和PF单独作用主要使细胞阻滞在G1期（P<0.05），Afatinib与PF联合作用时细胞在G1期和G2期均有阻滞（P<0.05）；Afatinib和PF单用时较对照组的细胞凋亡率增加，且当两者联合作用时凋亡率增加更显著（P<0.05）。（3）Afatinib和Trematinib联合对H1975细胞增殖表现出协同抑制作用；Afatinib和Trematinib主要使细胞阻滞在G1期，联合作用时细胞阻滞在G1期的百分比明显增加（P<0.05）；Afatinib和Trematinib联合作用组相比对照组和单药组其凋亡率均增加（P<0.05）；Afatinib和Trematinib联合作用组相比对照组和单药组其活性氧浓度也明显增加（P<0.05）。结论：（1）EGFR可逆抑制剂和Pan-HER抑制剂对EGFR高表达的胃癌细胞株N87的增殖抑制作用强于对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975的增殖抑制作用，且Pan-HER抑制剂相比EGFR可逆抑制剂对两种细胞的增殖抑制作用均显现出明显优势。（2） Pan-HER抑制剂Afatinib和PI3K抑制剂PF联合对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975的增殖、迁移和凋亡有协同抑制作用，可能与其使细胞周期阻滞在G1期有关。（3）Pan-HER抑制剂Afatinib和MEK抑制剂Trematinib联合对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975的增殖和凋亡均有协同抑制作用，可能与其阻滞细胞周期在G1期和使细胞活性氧浓度增加等有关。（4）Pan-HER抑制剂与PI3K抑制剂和MEK抑制剂联合作用时可以增加对耐药性非小细胞肺癌细胞株H1975的体外抗肿瘤活性，对临床联合用药有一定的指导意义。