论文摘要
目的观察糜蛋白酶抑制剂对糖尿病仓鼠肾脏的保护作用，进而探讨其保护肾脏损伤的机理。方法STZ腹腔注射法制备仓鼠糖尿病模型。实验分为4组，糖尿病模型组、胰岛素治疗组、雷米普利治疗组和糜蛋白酶抑制剂治疗组。通过分子生物学技术、免疫组织化学技术、免疫印记技术检测各组动物糜蛋白酶，RAS成分：ACE、肾素、ANG-I、ANG-II；氧化应激成分：NOX-4，p22p hox，以及TGF-β1的表达情况。结果糖尿病组仓鼠肾小管和血管球糜蛋白酶表达明显提高。给予糜蛋白酶抑制剂并没有影响血清ANG-II水平，但是完全抑制了糖尿病仓鼠肾内ANG-II升高(P<0.01)。糜蛋白酶抑制剂治疗后明显降低了8-OHdG分泌水平(P<0.01)。NOX-4和p22phox染色结果表明：糖尿病组血管球和肾小管区域氧化产物显著增高，而糜蛋白酶抑制剂可以抑制氧化产物的升高(P<0.01)。 Western blot分析也证实了糖尿病组血管球NOX-4和p22ph ox蛋白的水平较对照组高，糜蛋白酶抑制剂组显著降低了NOX-4和p22ph ox蛋白表达(P<0.01)。糜蛋白酶抑制剂治疗后4w时完全抑制了蛋白尿(P<0.01)，雷米普利组对NAD(P)H氧化酶未见有明显统计学差异。免疫印迹分析证实了血管球TGF-β1表达糖尿病组高于对照组(P<0.05)，同样糜蛋白酶抑制剂治疗后大大降低了TGF-β1水平(P<0.01)。结论糜蛋白酶抑制剂能够对糖尿病仓鼠的肾功能起到保护作用，其机制是通过降低肾内ANG-II水平和氧化应激水平来保护糖尿病肾脏损伤。