论文摘要
目的：在小鼠肿瘤模型中探讨Galectin-9缺失对肿瘤生长和转移的影响，并且分析Galectin-9缺失对CD8+T细胞频率、表型和功能影响以及对Treg细胞频率影响，探讨Galectin-9在肿瘤免疫中的作用。方法：分别建立B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠右后肢外侧皮下注射模型和EG7-OVA淋巴瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠右后肢外侧皮下注射模型，待体内出现荷瘤开始，每2天监测肿瘤体积，3周后分别绘制两种肿瘤生长曲线并且比较G9KO-/-C57BL/6两组小鼠肿瘤生成差异；建立B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠尾静脉注射模型，密切观察肺部肿瘤转移情况，2周后统计肺部黑色素瘤结节数量，观察G9KO-/-C57BL/6两组小鼠在肿瘤转移的差异；取B16F10黑色素瘤G9KO-/-C57BL/6小鼠右后肢皮下实体瘤模型，分别完全分离出肿瘤瘤体，用酶消化法提取肿瘤浸润淋巴细胞，并且制备成单细胞悬液，流式细胞术检测TIL中的CD8+T淋巴细胞频率以及表型，用佛波酯刺激CD8+T细胞4-6h，检测细胞分泌INF-量，分析CD8+T淋巴细胞功能。同时也检测TIL中CD4+Foxp3+Treg细胞的频率，分析CD8+T细胞频率与Treg细胞频率的比值。结果：在小鼠实体荷瘤模型中，G9KO小鼠相对于WT小鼠能明显抵制B16F10(P<0.05)和EG7(P<0.05)肿瘤在机体内的生长，延长小鼠存活时间；G9KO小鼠能显著抑制黑色素瘤向肺部的转移（P<0.001）；流式检测显示G9KO小鼠相对于WT小鼠，在CD8+T淋巴细胞数量上没有差异，但G9KO小鼠能上调肿瘤局部CD8+T淋巴细胞频率（P<0.001），同时G9KO小鼠能明显下调功能耗竭CD8+T淋巴细胞表型（Tim-3+，PD-1+Tim-3+）的频率(P<0.05,P<0.001)，G9KO小鼠能促进CD8+T细胞分泌INF-(P<0.01)。在肿瘤局部主要聚集着CD4+Foxp3+Treg细胞，G9KO小鼠相对于WT小鼠，能明显下调肿瘤局部的CD4+Foxp3+Treg细胞频率（P<0.01）；G9KO小鼠增加了肿瘤局部CD8+T细胞数量降低Treg细胞数量，使得CD8/Tregs比值上升（P<0.001），结论：Galectin-9的缺失能延缓肿瘤在机体内的生长，抑制肿瘤的转移，减轻肿瘤特异性CD8+T细胞耗竭，并且能减弱肿瘤局部Treg细胞免疫抑制功能，进而增强机体抗肿瘤免疫。