论文摘要
目的探讨山奈酚对动脉粥样硬化模型家兔的防治作用及其作用机理，观察其对血管炎症中的炎性分子如选择素E（E-sel）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）及血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）的影响；同时探讨山奈酚（Kaempferol）在家兔体内的药代动力学参数。方法1、将30只家兔随机分为5组：正常对照组、模型组、阳性药物组（菲诺贝特，12mg/kg）、山奈酚大剂量（150mg/kg）和小剂量组（30mg/kg），分别给以正常及高脂饲料喂养10周；并于第6周、10周末对各动物称重，检测血清脂质水平，测定血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量；10周末，油红O染色法测主动脉斑块面积，HE染色观察主动脉形态学改变。2、第10周末，采用ELASA法测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的含量，Western blot蛋白印迹法及免疫组化法检测主动脉组织选择素E（E-sel）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）及血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）的表达，逆转录聚合酶链反应法（PT-PCR）检测主动脉E-sel、ICAM-1和VCAM-1mRNA表达。3、建立高效液相色谱法（HPLC）测定家兔血浆中山奈酚的血药浓度，对6只家兔分别给予山奈酚2.0mg/kg静脉注射，均于给药后1，3，5，10，15，20，40，80，160，240min分别取血1mL，采用HPLC法检测血药浓度，3p97软件计算药动学参数。结果1、模型组家兔经10周高脂喂养后血管发生典型动脉粥样硬化病变，主动脉粥样硬化斑块面积较正常组明显增多，而山萘酚组较模型组显著减少。第6、10周末，各实验组之间动物体重无显著差异，但模型组家兔血脂升高明显，给予山萘酚喂养的家兔血脂较模型组显著下降；同时，模型组家兔血清MDA含量较正常组明显增高，SOD活性明显降低，与模型组相比，山萘酚组MDA含量显著降低，SOD活性显著增高。2、第10周末，模型组动物血清TNF-α和IL-1β含量及主动脉选择素E、ICAM-1和VCAM-1mRNA与蛋白的表达明显增加，与模型组相比，山奈酚给药10周能显著降低血清TNF-α、IL-1β水平，同时对选择素E、ICAM-1和VCAM-1mRNA与蛋白的表达有明显抑制作用。3、家兔静注山奈酚的药-时曲线符合二室模型，主要药动学参数如下：T1/2α=（0.957±0.172）min；T1/2β=（6.409±1.584）min； AUC0→t=（75.969±5.804）（μg·min）/mL；CL=（0.034±0.003）mg/kg/min（μg/mL）。结论1、山奈酚对高脂诱导家兔动脉粥样硬化有良好的防治作用，可显著改善血管动脉粥样硬化病变，其机理可能与降脂、抗氧化及抑制血管炎症有关。2、山奈酚对血管炎症的影响可能是通过调节血管粘附分子如选择素E、ICAM-1和VCAM-1的基因及蛋白的表达来实现的。3、山奈酚经静注给药后，在家兔体内代谢快，血药浓度下降迅速，30min后消除达95%以上。